酵母型真菌代谢工程编辑与标记回收
项目背景
客户以酵母底盘进行蛋白表达与代谢途径改造,要求完成单基因及多基因组合编辑,并尽可能回收筛选标记,以便进行连续多轮改造。
目标菌株
- 酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
- 毕赤酵母 Pichia pastoris(Komagataella phaffii)
- 解脂耶氏酵母 Yarrowia lipolytica
编辑策略
采用 CRISPR/Cas 或经典同源重组路线,依据菌株特性与改造目标选择最优方案:
- 单基因 / 多基因同步敲除与整合
- 基因组整合表达框构建,适配真核翻译后修饰与分泌表达
- Cre-loxP 或 counter-selection 标记回收,实现多轮连续编辑
- 代谢通路模块化组装与优化
交付成果
- 稳定交付单基因与多基因编辑株,阳性克隆经测序确认
- 支持标记回收的编辑株系,便于后续通路迭代
- 针对分泌表达与翻译后修饰需求,提供高性价比酵母底盘改造方案
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