细菌转座子突变体文库构建

转座子随机插入突变体库是解析细菌全基因组功能的经典工具。锐志魔方基于 Himar1 等 mariner 家族转座元件,为革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌及支原体构建覆盖度高、随机性好的单基因突变体库。

技术原理

转座子插入破坏编码基因示意图
转座子插入宿主基因内部可直接打断阅读框,形成单基因突变体;将各突变体汇集即可构成全基因组突变体文库。

我们的技术优势

  • 高随机性:采用 Himar1 转座酶,催化 TA 双核苷酸位点单拷贝插入,覆盖全基因组。
  • 多物种适配:已建立大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、弧菌、巴氏杆菌等多种细菌的建库体系。
  • 一站式交付:从质粒构建、电转化/接合转移、文库扩增到后续 Cubes-seq 插入位点鉴定。
  • 文库可复用:同一次构建的突变体库可多次用于不同表型筛选,显著降低科研成本。

应用方向

  • 必需基因 / 非必需基因全局注释
  • 致病性、耐药性、生物膜形成相关基因筛选
  • 代谢通路、营养利用、环境胁迫响应机制研究
  • 疫苗候选抗原与药物靶点发掘