MIC / MBC / 抑菌圈 / 抑菌率测定

MIC、MBC、抑菌圈与抑菌率是抗菌药物和抑菌材料从“能不能抑制”到“能不能杀灭”的定量/半定量基础数据。锐志魔方按 CLSI 与《中国药典》要求,建立微量肉汤稀释法、平板计数法、纸片扩散 / 牛津杯法及振荡法抑菌率体系,覆盖细菌、真菌与厌氧菌。

一、MIC / MBC:抑菌与杀菌的最低浓度

最低抑菌浓度(MIC)是药物能抑制微生物肉眼可见生长的最低浓度;最低杀菌浓度(MBC)则是使存活菌数下降 99.9%(降低 3 个数量级)的最低浓度。二者结合可区分抑菌剂与杀菌剂。平台采用 96 孔板肉汤二倍稀释法,测定 600 nm 吸光值判定终点,再取未长菌孔菌液涂布固体培养基确认 MBC。

MIC 二倍稀释 96 孔板
图 1 MIC 微量肉汤稀释法 96 孔板:药物沿列 2 倍递减,以浊度判定最低抑菌浓度。
MBC 验证平板
图 2 MBC 验证:将 MIC 及更高浓度孔菌液涂布平板,菌落数 <10 CFU 的最低浓度即为 MBC。

二、抑菌圈测定:纸片扩散法与牛津杯法

抑菌圈试验利用抗菌剂在琼脂中扩散形成浓度梯度,通过测量无菌区直径快速判断细菌对药物的敏感性。纸片扩散法(Kirby-Bauer)操作简便,牛津杯法则适合液体或凝胶样品。两种方法均为定性/半定量,常用于临床初筛与材料抗菌活性初评。

抑菌圈测量示例
图 3 纸片扩散法 / 牛津杯法抑菌圈测量:耐药(0 mm)、敏感(27.6 mm)及不同受试物的抑菌圈直径。
多种药物抑菌圈结果
图 4 多条件抑菌圈测定结果展示,可同时比较药物、材料或不同菌株的敏感性差异。

三、抑菌率测定:振荡法

振荡法抑菌率测试适用于纺织品、敷料、凝胶等固体或半固体样品。将样品浸于接种菌液中振荡培养后,通过平板计数比较对照组与处理组的活菌数,计算抑菌率。该方法对样品形状和吸水性要求低,重复性与可比性较好。

抑菌率平板计数
图 5 振荡法抑菌率测定:不同样品处理后活菌落数差异,可直接计算抑菌率。

四、应用与交付

  • 抗菌肽 / 小分子 / 植物提取物的 MIC、MBC、抑菌圈初筛;
  • 医用材料、敷料、涂层表面的抑菌率定量评价;
  • 耐药诱导过程中 MIC 变化监测;
  • 交付:原始 OD / 计数表、照片、中英文报告。

典型项目经验

抗菌肽 MIC / MBC 测定
样品:合成多肽 / 抗菌肽样品 方法:微量肉汤稀释法测定 MIC;平板计数法验证 MBC 交付:MIC、MBC 值与原始 OD/计数表
材料抑菌圈与抑菌率
样品:医用敷料 / 凝胶 / 涂层样品 方法:纸片扩散 / 牛津杯法测抑菌圈;振荡法测抑菌率 交付:抑菌圈直径、抑菌率与照片