钙白荧光染色（Calcofluor White）

钙白荧光染色（Calcofluor White）是一种经典的真菌学染色方法，其荧光染料可特异性结合真菌细胞壁中的几丁质和纤维素样结构，在紫外或蓝光激发下发出明亮荧光，广泛用于真菌检测、定位、细胞壁形态观察及细胞内钙离子动态研究。

一、原理与应用

钙白（CFW）本身无荧光或荧光较弱，但与 β-1,4 连接的葡萄糖残基及几丁质结合后荧光显著增强。由于细菌细胞壁不含几丁质，CFW 对真菌具有较高选择性。在医学与环境中，它可用于：

• 临床标本（痰、组织、分泌物）中念珠菌、曲霉等病原真菌的快速检测；
• 真菌菌丝、孢子、生物膜结构的形态观察；
• 细胞内钙离子信号与细胞壁合成动态研究；
• 与 SYTOX Green 等核酸染料联合使用，区分活 / 死真菌。

二、适用真菌类型

钙白荧光染色适用于酵母样真菌（如 Candida 属）、丝状真菌（如 Aspergillus 属、Fusarium 属）及多种环境真菌的初步观察，是真菌学研究的基础工具之一。

三、注意事项

钙白荧光染色仅提供真菌细胞壁 / 钙离子信息，不能直接用于菌种鉴定。若需准确鉴定到种或属，应结合分子生物学方法（如真菌 ITS / 18S rRNA 测序、特异性 PCR）或形态学/免疫学手段。

四、参考文献

• Rasconi S, et al. Use of calcofluor white for detection, identification, and quantification of phytoplanktonic fungal parasites. Appl Environ Microbiol, 2009.
• Harrington B J, Hageage Jr G J. Calcofluor white: a review of its uses and applications in clinical mycology and parasitology. Lab Med, 2003.

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