微生物常见理化检测(生化鉴定)

微生物生化反应是菌种鉴定与代谢特征分析的重要依据。通过检测不同微生物对糖类、蛋白质、含硫/含氮化合物的代谢差异,可在形态和序列之外快速区分菌种。锐志魔方提供十余种经典理化/生化检测,覆盖糖酵解、酶活性、代谢产物等关键指标。

一、常见生化反应

  • 糖酵解试验:检测微生物利用糖类能力及产气情况;
  • 淀粉水解试验:判断淀粉酶产生能力,水解后遇碘不变蓝;
  • V-P 试验:检测乙酰甲基甲醇生成,阳性呈红色;
  • 甲基红试验:检测葡萄糖发酵产生大量酸性产物,pH < 4.5 显红色;
  • 吲哚试验:检测色氨酸分解生成吲哚,与对二甲基氨基苯醛形成玫瑰吲哚;
  • 硝酸盐还原试验:检测硝酸盐还原为亚硝酸盐、氨或氮气;
  • 明胶液化试验:检测明胶酶活性,明胶失去凝胶性质而液化;
  • 尿素酶试验:分解尿素产生氨,使酚红变粉红;
  • 氧化酶试验:检测细胞色素氧化酶,阳性显色;
  • 硫化氢试验:分解含硫氨基酸产生 H₂S,与铅盐/低铁盐生成黑色沉淀。
幽门螺杆菌尿素酶与氧化酶检测
图 1 幽门螺杆菌尿素酶(左)及氧化酶(右)检测:尿素酶阳性培养基变红,氧化酶阳性试纸变紫。

二、应用场景

  • 新分离菌株的初步分类与鉴定;
  • 工程菌株代谢表型验证;
  • 益生菌、病原菌的功能特性评价;
  • 与 API、BIOLOG、16S / MALDI-TOF 结果交叉验证。

典型项目经验

新分离菌株生化鉴定 panel
样品:待鉴定细菌 方法:糖酵解、V-P、甲基红、吲哚、H₂S、氧化酶、尿素酶等 交付:生化反应谱与鉴定建议
工程菌代谢表型验证
样品:基因编辑菌株 方法:目标生化反应验证 交付:表型验证报告